一种利用大白菜球叶获得再生植株的培养方法

一种利用大白菜球叶获得再生植株的培养方法

权利要求书一，涉及一种从大白菜球叶中培育再生植株的技术，具体操作步骤如下：首先，挑选结球期的大白菜外部球叶，去除叶柄一种利用大白菜球叶获得再生植株的培养方法，并在无菌环境中，用70%体积分数的酒精进行表面消毒30秒，随后用无菌水冲洗一次；接着，将叶片浸泡在5%质量分数的NaClO溶液中灭菌10分钟大白菜花药离体培养，再用无菌水轻轻冲洗15分钟，期间需更换水5至6次；消毒完成后，使用灭菌吸水纸将叶片上的残留水分吸干；最后大白菜花药离体培养，将灭菌处理过的叶片切割成边长为1.5至2.0厘米的叶块，避开较粗的叶脉，并将叶正面向上平铺在芽诱导培养基上。在光照强度为1500-的条件下，以光周期16小时每天一种利用大白菜球叶获得再生植株的培养方法，温度维持在24摄氏度正负1度的环境中进行培养；外植体在芽诱导培养基中培育28天后，再转移至MS基本培养基中继续生长，并将外植体上长度超过1.5厘米的再生不定芽切割下来，转入生根培养基中促进生根，所有这些培养过程均需保持光照强度1500-，光周期16小时每天，温度24摄氏度正负1度；待再生芽基部长出大量毛根后，打开培养瓶盖进行炼苗4至5天，清洗再生苗根部的生根培养基，然后将其栽种于由蛭石和草炭按体积比1∶1混合而成的固体基质塑料花盆中，盆口用保鲜膜覆盖以保持湿度，三天后，在保鲜膜表面戳几个小孔，之后逐渐增加打孔数量，孔径也逐渐增大，持续覆膜培养10天，之后揭去保鲜膜，将再生植株放置在室温环境中培养，整个基质栽培过程中，都提供自然光照。如权利要求1所提及的，通过大白菜球叶培育再生植株的技术，其显著特点在于步骤(2)中使用的芽诱导培养基成分包括MS培养基、6-BA、NAA、AgNO3、蔗糖以及琼脂，具体为每升MS培养基中添加6-BA 4毫克、NAA、AgNO3、蔗糖30克、琼脂0.7克，且pH值调至5.8。如权利要求1所描述的，通过大白菜球叶培育再生植株的方法，其显著特点在于，该方法的步骤(3)所使用的MS基本培养基是一种未添加激素的常规MS培养基。如权利要求1所描述的，通过大白菜球叶获取再生植株的培养技术，其显著特点在于步骤(3)中使用的生根培养基成分包括MS培养基、NAA生长素、蔗糖以及琼脂。具体来说大白菜花药离体培养，每升MS培养基中需加入0.5毫克的NAA生长素、30克的蔗糖和0.7毫克的琼脂，同时维持pH值为5.8。